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講義・実習 フローサイトメーターとセルソーターの活用法
Lecture & Practice How to Use Flow Cytometer and Cell Sorter

山元 武文・森 康博(実験実習支援センター)
Takefumi Yamamoto, Yasuhiro Mori (Central Research Laboratory)
協力: 日本ベクトンディッキンソン株式会社
Collaborator: Becton, Dickinson and Company

 

 フローサイトメーターは個々の細胞の分子の発現を半定量的に測定できる装置である。装置は解析専用のアナライザーと解析分取が可能なセルソーターの2機種があり、分子の発現の同定には蛍光色素で認識された抗体がよく用いられる。更に標識抗体以外の蛍光物質を測定する事も試みられている。
 今回は実習として、T細胞に注目し、ヒト血球細胞を用いて、実際に抗体を用いた染色を行い、FACSにて検出する。

 Flow cytometer is a device that can semi-quantitatively measure the expression of individual cell molecules. There are two types of devices, an analyzer and a cell sorter. Antibodies recognized by fluorescent dyes are often used to identify the expression of molecules. It has also been attempted to measure fluorescent substances other than labeled antibodies.
 As a practical training, we focused on T cells, we stained with antibodies using human blood cells, and detected with FACS.
*FACS (fluorescence activated cell sorter) is a trademark of Becton, Dickinson and company.


講義内容(前半) Lecture content(First half)

FACSの基本原理を紹介し、FACSを用いた実験手技については具体例を挙げながら説明します。(英語)
We will introduce the basic principle of FACS and explain the experimental technique using FACS with concrete examples. (English)


実習内容(後半) Practice content(Latter half)

ヒト血球細胞をCD3、CD4、CD8で染色し、FACSにて検出します。
アナライザーのBD FACSCalibur、BD FACSCantoUとセルソーターのBD FACSAriaの3機種を用いて解析を行います。
Human blood cells are stained with CD3, CD4, CD8 and detected with FACS.
We will analyze using three instrument, analyzer BD FACSCalibur and BD FACSCanto II, and cell sorter BD FACSAria.

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Last Updated 2018/7/30